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為加強藥品生產(chǎn)監(jiān)管，進一步指導和規(guī)范藥品生產(chǎn)企業(yè)科學系統(tǒng)地開展過濾技術(shù)及應用、無菌工藝模擬試驗，國家組織制定了《過濾技術(shù)及應用指南》《無菌工藝模擬試驗指南（無菌原料藥）》《無菌工藝模擬試驗指南（無菌制劑）》，作為實施《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》的指導性文件，現(xiàn)予發(fā)布，自2018年10月1日起施行。
為指導和規(guī)范過濾技術(shù)在無菌藥品生產(chǎn)中的應用，保證無菌藥品的安全、有效和質(zhì)量穩(wěn)定，依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》及附錄，制定本指南。
本指南不具有法律約束性，僅作為藥品生產(chǎn)企業(yè)、工程設計、設制造以及藥品監(jiān)管單位的人員參考使用。本指南是基于目前的認知與科技水平起草的，并不限制新技術(shù)與新方法的引入。企業(yè)可以采用經(jīng)過驗證的替代方法，達到本指南要求。
本指南中的過濾是指采用物理截留的方法去除液體或氣體中的微生物，以達到無菌藥品相關(guān)質(zhì)量要求的過程。
本指南包括過濾系統(tǒng)的設計、選擇、驗證、使用等內(nèi)容，適用于無菌藥品從工藝開發(fā)到上市生產(chǎn)的整個生命周期。
過濾工藝設計時，應根據(jù)待過濾介質(zhì)屬性及工藝目的，選擇合適的過濾器并確定過程參數(shù)。
過濾工藝應根據(jù)工藝目的，選用0.22微米（更小孔徑或相同過濾效力）的級過濾器。0.1微米的級過濾器通常用于支原體的去除。
對無菌藥品生產(chǎn)的全過程進行微生物控制，避免微生物污染。終過濾前，待過濾介質(zhì)的微生物污染水平一般小于等于10cfu/100ml。
選擇過濾器材質(zhì)時，應充分考察其與待過濾介質(zhì)的兼容性。過濾器不得因與產(chǎn)品發(fā)生反應、釋放物質(zhì)或吸附作用而對產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生不利影響。過濾器不得脫落纖維，嚴禁使用含有石棉的過濾器。
合理的過濾膜面積需要經(jīng)過科學的方法評估后得出。面積過大可能導致產(chǎn)品收率下降、過濾成本上升；過濾面積過小可能導致過濾時間延長、中途堵塞甚至產(chǎn)品報廢。
應注意過濾系統(tǒng)結(jié)構(gòu)的合理性，避免存在衛(wèi)生死角。過濾器進出口存在一定的限流作用。應根據(jù)工藝需要，選擇合適的進出口大小。
選擇過濾器時，應根據(jù)實際工藝要求，確定過濾溫度范圍、長過濾時間、過濾流速、條件、進出口壓差范圍或過濾流速范圍等工藝參數(shù)，并確認這些參數(shù)是否在可承受范圍內(nèi)。
藥品生產(chǎn)企業(yè)在選擇過濾器供應商時，應審核供應商提供的驗證文件和質(zhì)量證書，確保選擇的過濾器是級過濾器。藥品生產(chǎn)企業(yè)應將過濾器家作為供應商進行管理，例如進行文件審計或工現(xiàn)場審計、質(zhì)量協(xié)議和產(chǎn)品變更控制協(xié)議的簽訂等。
在設計過濾系統(tǒng)時，應充分認識過濾工藝的局限性。由于過濾器不能將病毒或支原體全部濾除，可采用熱處理等方法來彌補過濾的不足。
盡可能采取措施降低過濾的風險，例如宜安裝第二只已的過濾器，終的過濾濾器應當盡可能接近灌裝點。通常通過兩個或以上相同或遞減孔徑的過濾方式，統(tǒng)稱為序列過濾。序列過濾系統(tǒng)中，如果在終過濾器前增加一個級過濾器，并且確保兩個過濾器之間無菌，以及控制過濾前介質(zhì)的微生物污染水平一般小于等于10cfu/100ml，這種情況下稱為冗余過濾系統(tǒng)。冗余過濾系統(tǒng)中，接近灌裝點的過濾器稱為主過濾器，其前端的過濾器則稱為冗余過濾器。冗余過濾系統(tǒng)使用后，如果主過濾器完整性測試通過，則冗余過濾器不需要進行完整性測試；如果主過濾器完整性測試失敗，冗余過濾器必須通過完整性測試。另一種序列過濾系統(tǒng)是指在過濾工藝中經(jīng)過驗證需要一系列（兩個或以上）的級過濾器才能達到效果的系統(tǒng)，那么這一系列的過濾器被認為是一個單元，在使用后必須全部通過完整性測試。
過濾器位置設計時應該考慮有菌氣體或液體的釋放，并且根據(jù)產(chǎn)品批量、管路長短、安裝和方便性等，確認過濾器安裝的區(qū)域和位置。
過濾系統(tǒng)設計時，應考慮過濾器完整性測試的方便性及其給系統(tǒng)帶來的微生物污染風險。過濾器后，接觸其下游系統(tǒng)的氣體和沖洗液體必須是無菌的。
過濾系統(tǒng)設計時，應充分考慮系統(tǒng)的安全性和方便性。使用在線方式時，應考慮系統(tǒng)內(nèi)冷空氣及冷凝水的排放問題，從而保證系統(tǒng)溫度點也能達到預期的F0值。采用離線方法時，應充分考慮轉(zhuǎn)移和安裝過程的風險。例如：應注意氣流方向，操作人員的無菌操作過程，以及可考慮無菌連接器等連接方案。
若采用一次性過濾系統(tǒng)且需進行使用前完整性測試或預沖洗，在設計時需額外考慮如下因素：上游連接管路的耐壓性、下游的無菌性、下游能提供足夠的空間（比如安裝級屏障過濾器或相應體積的無菌袋）進行排氣排水。如果使用一次性無菌連接裝置，應有文件證明不會有微生物進入污染的風險。
本指南所述的過濾驗證包含過濾器本身的性能確認和過濾工藝驗證兩部分。過濾器性能確認和過濾工藝驗證，兩者很難互相替代，應獨立完成。
過濾器本身的性能確認一般由過濾器生產(chǎn)商完成，主要的確認項目包括微生物截留測試、完整性測試、生物安全測試（毒性測試和內(nèi)毒素測試）、流速測試、水壓測試、多次測試、可提取物測試、顆粒物釋放測試和纖維脫落測試等。
過濾工藝驗證是指針對具體的待過濾介質(zhì)，結(jié)合特定的工藝條件而實施的驗證過程，一般包括細菌截留試驗、化學兼容性試驗、可提取物或浸出物試驗、安全性評估和吸附評估等內(nèi)容。如果過濾后，以產(chǎn)品作為潤濕介質(zhì)進行完整性測試，還應進行相關(guān)的產(chǎn)品完整性測試驗證。過濾工藝驗證可以由過濾器的使用者或委托試驗檢測機構(gòu)（例如：過濾器的生產(chǎn)者或第三方試驗室）完成，但過濾器使用者應終保證實際生產(chǎn)過程中操作參數(shù)和允許的極值在驗證時已被覆蓋，并有相應證明文件。
不同過濾器生產(chǎn)商的驗證文件一般是不能相互替代的，同一生產(chǎn)商的同一材質(zhì)的過濾驗證文件往往也不能直接互換，除非有合理的聲明或文件支持。如果在生產(chǎn)過程中有兩個或以上不同生產(chǎn)商提供同一材質(zhì)或者不同材質(zhì)的過濾器，或同一生產(chǎn)商的同一材質(zhì)（不同的成膜工藝）的過濾器，驗證應該分別進行。
細菌截留試驗的研究目的是模擬實際生產(chǎn)過濾工藝中的差條件，過濾含有一定量挑戰(zhàn)微生物的產(chǎn)品溶液或者產(chǎn)品替代溶液，以確認過濾器的微生物截留能力。
缺陷型假單胞菌（直徑大約為0.3-0.4微米，長度0.6-1.0微米，必須是單一的、分散的細胞），是過濾驗證中細菌截留試驗的標準挑戰(zhàn)微生物。在有些情況下，缺陷型假單胞菌不能代表差條件，則需要考慮采用其他細菌。如果使用其他細菌，應保證該細菌足夠細小，以挑戰(zhàn)級過濾器的截留性能，并能代表產(chǎn)品及生產(chǎn)過程中發(fā)現(xiàn)的小微生物。
在過濾驗證中使用濾膜還是濾器，取決于驗證的目的。如果微生物截留試驗的目的是驗證過濾工藝中特定膜材的細菌截留效能，那么使用濾膜是能滿足需要的。微生物截留試驗中所用的濾膜必須和實際生產(chǎn)中所用過濾器材質(zhì)相同，并應包括多個批次（通常三個批次）。其中至少應有一個批次為低起泡點（低規(guī)格）濾膜。為了在微生物挑戰(zhàn)試驗中實施差條件，一般需要使用完整性測試的數(shù)值非常接近過濾器生產(chǎn)商提供的濾器完整性限值的濾膜（例如不高于標準完整性限值的110%）。如果在驗證中沒有使用低起泡點濾膜，那么在實際生產(chǎn)中所使用的標準溶液濾膜/芯起泡點值，必須高于驗證試驗中實際使用的濾膜的小起泡點值。
微生物截留試驗應選擇0.45微米孔徑的濾膜作為每個試驗的陽性對照。挑戰(zhàn)微生物的尺寸需要能夠穿透過0.45微米的濾膜，以證明它培養(yǎng)到合適的大小和濃度。三個不同批號的0.22微米（或0.2微米）測試濾膜和0.45微米的對照濾膜都需在一個試驗系統(tǒng)中平行在線進行挑戰(zhàn)試驗。
應盡可能將挑戰(zhàn)微生物直接接種在藥品中進行細菌挑戰(zhàn)。但是藥品和/或工藝條件本身可能會影響挑戰(zhàn)微生物的存活力，因此在進行細菌截留實驗之前，需要確認挑戰(zhàn)微生物于工藝條件下在藥品中的存活情況，以確定合理的細菌挑戰(zhàn)方法，也即活度實驗（生存性實驗）。如果使用替代溶液進行試驗，需要提供合理的數(shù)據(jù)和解釋。對于同一族產(chǎn)品，即具有相同組分而不同濃度的產(chǎn)品，可以用挑戰(zhàn)極限濃度的方法進行驗證。過濾溫度、過濾時間、過濾批量和壓差或流速會影響細菌截留試驗的結(jié)果。
浸出物存在于終原料藥和藥品中，通常包含在可提取物內(nèi)，但由于分離和檢測方法的限制以及浸出物的量極小，很難被定量或定性。應先獲得差條件下的可提取物數(shù)據(jù)，將其用于藥品的安全性評估?？商崛∥锓从沉私鑫锏目赡?，無論是否要做浸出物試驗，可提取物的測試和評估都非常重要。
可提取物試驗在選擇模型溶劑之前必須對產(chǎn)品（藥品）處方進行全面的評估。用于測試的模型溶劑應能夠模擬實際的藥品處方，同時與過濾器不應有化學兼容性方面的問題。通常應具有與產(chǎn)品相同或相似的理化性質(zhì)，如pH值、極性或離子強度等。如果使用了模型溶劑或幾種溶液合并的方式，則必須提供溶液選擇的合理依據(jù)。
可提取物試驗可以用靜態(tài)浸泡或循環(huán)流動的方法，其影響因素包括方法、沖洗、過濾流體的化學性質(zhì)、工藝時間、工藝溫度、過濾量與過濾膜面積之比等。使用長過濾時間、過濾溫度、多次蒸汽循環(huán)、增加伽瑪輻射的次數(shù)和劑量都可能會增加可提取物水平。可提取物試驗應使用后的濾器來完成。用于試驗的過濾器盡量不進行預沖洗。
可提取物和浸出物的檢測方法包括定量和定性兩類。如非揮發(fā)性殘留物（NVR）、紫外光譜、反相高效液相色譜法（RP-HPLC）、傅立葉變換紅外光譜法（FTIR）、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）、液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）、總有機碳分析（TOC）等。為了保證分析方法的可靠性，需對分析方法進行驗證或確認。選擇哪幾種分析方法，取決于實際的藥品和生產(chǎn)工藝以及過濾器生產(chǎn)商對過濾器的充分研究。
在完成可提取物或者浸出物試驗后，應針對過濾器可提取物或浸出物的種類和含量，結(jié)合藥品終劑型中的濃度、劑量大小、給藥時間、給藥途徑等對結(jié)果進行安全性評估，以評估可提取物和浸出物是否存在安全性風險。
化學兼容性試驗用來評估在特定工藝條件下，待過濾介質(zhì)對過濾裝置的化學影響。
化學兼容性試驗應涵蓋整個過濾裝置，不只是濾膜。試驗的設計應考慮待過濾介質(zhì)性質(zhì)、過濾溫度和接觸時間等。試驗過程中的過濾時間應達到或者超過實際生產(chǎn)過程的長工藝時間，過濾溫度應達到或者超過生產(chǎn)過程的溫度。
化學兼容性試驗檢測項目一般包括：過濾器接觸待過濾介質(zhì)前后的目視檢查；過濾過程中流速變化；濾膜重量/厚度的變化；過濾前后起泡點等完整性測試數(shù)值的變化；濾膜拉伸強度的變化；濾膜電鏡掃描確認等。應基于對濾膜和濾器材料的充分了解，綜合選擇上述多種檢測方法。
待過濾介質(zhì)中的某些成分粘附在濾器上的過程，可能影響待過濾介質(zhì)的組成和濃度。過濾器中吸附性的材料包括濾膜、外殼和支撐性材料。流速、過濾時間、待過濾介質(zhì)濃度、防腐劑濃度、溫度和pH值等因素都可能影響吸附效果。
應明確過濾器使用后完整性測試的潤濕介質(zhì)。如果采用的潤濕介質(zhì)為藥液，則應進行產(chǎn)品相關(guān)完整性標準的驗證以支持該標準的確定。實驗室規(guī)模下按比例縮小的研究是產(chǎn)品完整性試驗的部分。第二部分是在實際工藝條件下定期監(jiān)測產(chǎn)品起泡點或者產(chǎn)品擴散流的趨勢，作為驗證的一部分。
完成過濾工藝的驗證之后，還應當定期評估產(chǎn)品性質(zhì)和工藝條件，以確定是否需要進行再驗證。產(chǎn)品、過濾器、工藝參數(shù)等變量中任何一個發(fā)生改變，均需要評估是否需要再驗證。至少（但不限于）對以下內(nèi)容進行評估，以決定是否需要開展再驗證：
過濾器生產(chǎn)商改變，過濾器生產(chǎn)工藝的變更，或者過濾器的膜材或結(jié)構(gòu)性組成發(fā)生改變
除了上述液體過濾的驗證，對于氣體過濾的驗證，過濾器使用者應首先評估過濾器生產(chǎn)商的驗證文件是否已經(jīng)能覆蓋實際生產(chǎn)中的不同應用。應對氣體過濾器的使用壽命以及更換頻率進行評估。評估應從以下幾個方面考慮：過濾器完整性、外觀、次數(shù)、工作的溫度、使用點等。
一次性過濾系統(tǒng)除過濾器外，通常還包含其他組件。在驗證時應充分考慮其他組件對工藝和產(chǎn)品的安全性及有效性的影響。
過濾器安放位置應便于其安裝、拆卸、檢測等操作并且不能影響其使用功能。過濾器與支撐過濾器的設、地面、墻面等連接應牢固可靠。過濾器各部件間應接合緊密，密封良好，能夠耐受生產(chǎn)操作壓力，且無泄漏、變形。濾器、濾膜安裝前應確認其規(guī)格、型號、外觀符合要求。組裝過程中，應盡量避免污染。應按照濾器的使用說明進行安裝。如果現(xiàn)場有多種規(guī)格濾器時，應有第二人對濾器信息進行復核確認，復核應有記錄。
為了減少濾器產(chǎn)生的顆粒及其他異物影響產(chǎn)品，可對安裝好的過濾系統(tǒng)進行必要的預沖洗。應結(jié)合供應商提供的方法進行沖洗。沖洗方法應經(jīng)過驗證。在正常操作時，沖洗量應不低于驗證的沖洗量。沖洗后應采用適當方法排除沖洗液。
過濾系統(tǒng)應進行風險評估，盡量進行密閉性確認。過濾器上游系統(tǒng)密閉性可通過壓力保持和在線完整性測試等方式確認。過濾器下游密閉性可通過壓力保持進行確認，相關(guān)參數(shù)應經(jīng)過驗證。
過濾應在規(guī)定的工藝控制參數(shù)范圍內(nèi)進行，為保證過濾的有效性，應對影響過濾效果的關(guān)鍵參數(shù)進行控制和記錄。控制項目應包括過濾溫度、時間、壓力、上下游壓差等；系統(tǒng)的參數(shù)、無菌接收容器的參數(shù)；以及過濾器完整性測試結(jié)果等。
除了過程參數(shù)，還應對濾器的關(guān)鍵信息進行記錄（如：貨號、批號和序列號，或其他識別號），以利追溯。
應制定企業(yè)的培訓計劃，過濾器的相關(guān)培訓應納入培訓計劃中。培訓內(nèi)容包括理論知識及操作技能。理論知識培訓包括濾器生產(chǎn)商提供的使用說明、工作原理、相關(guān)參數(shù)及濾芯、過濾系統(tǒng)相關(guān)驗證要求；操作技能培訓包括相關(guān)濾芯使用的標準操作規(guī)程，如完整性測試培訓、清洗、干燥、保存等操作培訓、產(chǎn)品過濾工藝培訓、系統(tǒng)密閉性測試培訓等。應對人員進行理論和實際操作考核，考核合格后上崗。當系統(tǒng)或參數(shù)發(fā)生變更，相關(guān)的標準操作規(guī)程內(nèi)容修訂后，應對人員進行再培訓。
過濾工藝過程發(fā)生偏差時，應進行深入的調(diào)查，以找到根本原因并采取糾偏措施。對發(fā)生偏差的產(chǎn)品應進行風險評估。
使用前，過濾器必須經(jīng)過處理（如在線或離線蒸汽，輻射等）。在線蒸汽的設計及操作過程應重點考慮濾芯可耐受的壓差及溫度。開始前應從濾器及管道設中排出系統(tǒng)內(nèi)的非冷凝氣體和冷凝水。過程中，過濾系統(tǒng)內(nèi)部冷點應達到設定的溫度。在整個過程中，濾芯上下游壓差不能超過濾芯在特定溫度下可承受的壓差。完成后，可引入潔凈的空氣或其他適合氣體來對系統(tǒng)進行降溫。降溫時應維持一定的正向壓力以保持系統(tǒng)的無菌狀態(tài)。
使用器進行時，通常采用脈動真空方法。過程應保證濾器能被蒸汽穿透，從而對過濾器進行。不論采用濾芯加不銹鋼套筒還是囊式濾器的形式，濾器的進口端和出口端都應能透過蒸汽。應參考濾器生產(chǎn)商提供的參數(shù)進行。溫度過高可能導致過濾器上的高分子聚合物材質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定，并可能影響濾器的物理完整性或增高可提取物水平。
過濾中可能會用到濾器、一次性袋子、軟管等裝置，這些物品可采用輻射的方式進行。已被輻射過的過濾器、袋子及軟管等，由于累積劑量效應的緣故，通常不應被多次。如果再加以蒸汽，則可能增加可提取物水平，除非對過濾器的輻照和蒸汽重復進行了驗證。
罐體呼吸器采用在線蒸汽進行時，可采用反向進蒸汽的方式，即蒸汽直接引入罐體，然后從呼吸器濾芯下游穿過濾芯，從上游排出。但應控制濾芯時的反向壓差。此壓差應保持在濾芯可耐受壓差范圍之內(nèi)。反向時建議使用帶有卡入式接口的濾芯，不建議采用直插式濾芯。
過濾器使用后，必須采用適當?shù)姆椒⒓磳ζ渫暾赃M行測試并記錄。過濾器使用前，應當進行風險評估來確定是否進行完整性測試，并確定在前還是后進行。當進行后-使用前完整性測試時，需要采取措施保證過濾器下游的無菌性。常用的完整性測試方法有起泡點測試、擴散流/前進流試驗或水侵入法測試。
進入和B級潔凈區(qū)的劑，應經(jīng)過濾或采用其他適當方法。如果使用過濾方法，應評估劑與所選擇濾器材質(zhì)之間的適用性。濾器使用后需進行完整性測試。
用于直接接觸無菌藥液或無菌設表面的氣體的過濾器，應在每批或多批次連續(xù)生產(chǎn)結(jié)束后對其進行完整性測試。對于其他的應用，可以根據(jù)風險評估的結(jié)果，制定完整性測試的頻率。氣體過濾器的完整性測試，可以使用低表面張力的液體潤濕，進行起泡點或者擴散流/前進流的測試；也可以使用水侵入法測試。水侵入法可作為優(yōu)先選擇。
對于冗余過濾，使用后應先對主過濾器進行完整性測試，如果主過濾器完整性測試通過，則冗余過濾器不需要進行完整性測試；如果主過濾器完整性測試失敗，則需要對冗余過濾器進行完整性測試。冗余過濾器完整性測試結(jié)果可作為產(chǎn)品放行的依據(jù)。過濾器使用前，應通過風險評估的方式確定是否進行完整性測試，以及測試哪一級過濾器或者兩級過濾器都要進行檢測，噴霧干燥并確定在過濾器前還是后進行。后的檢測，應考慮確保兩級過濾器之間的無菌性。
可根據(jù)工藝需要和實際條件，決定采用在線完整性測試或者離線完整性測試。但應注意，完整性測試是檢測整個過濾系統(tǒng)的完整性，而非僅針對過濾器本身。在線測試能更好地保證上下游連接的完整性。當無法滿足在線測試條件時，可選擇進行離線完整性測試。此時應將過濾器保持在套筒中整體拆卸，并直接進行測試，不應將濾芯從不銹鋼套筒拆卸單獨測試。
考慮到完整性測試結(jié)果的客觀性以及數(shù)據(jù)可靠性，應盡可能在關(guān)鍵使用點使用自動化完整性測試儀。自動化完整性測試儀應在使用前，進行安裝確認、運行確認和性能確認。應建立該設使用、清潔和維護的操作規(guī)程，以及定期的預防性維護計劃（其中應當包含設的定期校驗要求）。
對于標準介質(zhì)（水或者某些醇類）潤濕的過濾器完整性測試，其參數(shù)的設定應以過濾器生產(chǎn)家提供的參數(shù)為標準，且該參數(shù)必須經(jīng)過過濾器生產(chǎn)家驗證，證明其與細菌截留結(jié)果相關(guān)聯(lián)。通常該參數(shù)可在過濾器的質(zhì)量證書上獲得。
如果實際工藝中，需要用非標準介質(zhì)（通常為實際產(chǎn)品）潤濕，進行過濾器完整性測試，則完整性測試限值，如產(chǎn)品起泡點或者產(chǎn)品擴散流標準，必須通過實際產(chǎn)品作為潤濕介質(zhì)進行的驗證獲得。
應建立完整性測試的標準操作程序，包括測試方法、測試參數(shù)的設定、潤濕液體的性質(zhì)和溫度、潤濕的操作流程（如壓力、時間和流速范圍）、測試的氣體、數(shù)據(jù)的記錄要求等內(nèi)容。
對完整性測試結(jié)果的判定，不應該直接看“通過/不通過”，應該對測試結(jié)果的具體數(shù)值或者自動完整性測試儀報告中的過程數(shù)據(jù)進行完整記錄并審核。
如果完整性測試失敗，需記錄并進行調(diào)查?？煽紤]的影響因素有：潤濕不充分、產(chǎn)品殘留、過濾器安裝不正確、系統(tǒng)泄漏、不正確的過濾器、自動化程序設置錯誤和測試設問題等。再測試時，應根據(jù)分析結(jié)果采取以下措施，如加強潤濕條件、加強清洗條件、用低表面張力液體如醇類進行潤濕，檢測系統(tǒng)密閉性、核對過濾器的型號是否正確、檢查自動化程序設置和檢查設等。再測試的過程和結(jié)果都應當有完的文件記錄。
液體過濾器在設計和制造時，一般只考慮了在單一批次中的使用情況，或者在多批次連續(xù)生產(chǎn)周期內(nèi)使用的情形。但是在實際工作中，有時過濾器被使用在多批次、同一產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝中。一般認為“液體級過濾器的重復使用”可以定義為：用于同一液體產(chǎn)品的多批次過濾。以下情況都屬于液體過濾器重復使用情況：
在充分了解產(chǎn)品和工藝風險的基礎上，采用風險評估的方式，對能否反復使用過濾器進行評價。風險因素包括：細菌的穿透、過濾器完整性缺陷、可提取物的增加、清洗方法對產(chǎn)品內(nèi)各組分清洗的適用性、產(chǎn)品存在的殘留（或組分經(jīng)后的衍生物）對下一批次產(chǎn)品質(zhì)量風險的影響、過濾器過早堵塞、過濾器組件老化引起的性能改變等。評估應考慮個體化差異，提供充分的驗證和數(shù)據(jù)支持，在使用過程中應持續(xù)監(jiān)測。
由于濾膜的疏水性，氣體過濾器可使氣體自由通過。但由于系統(tǒng)或環(huán)境溫度變化而產(chǎn)生的冷凝水則可能會導致氣體過濾不暢，嚴重時會導致系統(tǒng)或濾器損壞。如有必要，應在過濾管線上的合理位置安裝冷凝水排放裝置。對于罐體呼吸用過濾器，應根據(jù)實際情況決定是否安裝加熱套，以保證氣體順利通過濾芯。
因為一次性過濾系統(tǒng)預的特殊性，在拆包裝時需要確認：外包裝是否完好；產(chǎn)品仍在有效期內(nèi)；包裝上具有預標簽且能判斷已經(jīng)過預處理；以及組件正確性；是否破損、明顯的異源物質(zhì)等。
在決定一次性過濾系統(tǒng)使用前是否進行完整性測試時，應基于以下因素進行風險評估（但不局限于以下因素）：
相對于過濾，減菌過濾是通過過濾的方法將待過濾介質(zhì)中的微生物污染水平下降到可接受程度的過濾工藝。
減菌過濾通常設計在：終端工藝生產(chǎn)的無菌制劑的灌裝前端，或非終工藝生產(chǎn)的無菌制劑的過濾工序前端。減菌過濾的目的是使產(chǎn)品終前或過濾前的微生物污染水平符合預期。
減菌過濾系統(tǒng)應采用孔徑0.45微米或0.22（或以下）微米的過濾器，以獲得可接受的微生物污染水平。過濾系統(tǒng)的設計應以工藝參數(shù)和結(jié)果可控為目標，綜合考慮：過濾器的尺寸、過濾藥液量、過濾時間、過濾壓差、藥液的接收和儲存的方式和時間等要素。由于過濾前后的藥液是非無菌的，設計時應注意藥液中微生物污染水平的變化。
應通過驗證來確認減菌過濾器不會對藥液產(chǎn)生負面影響。減菌過濾工藝的驗證可作為產(chǎn)品工藝驗證的一部分。
減菌過濾的正常運行是保證產(chǎn)品終前（或過濾前）的微生物污染水平符合可接受程度的重要措施。減菌過濾工藝驗證應包括化學兼容性，可提取物/浸出物及吸附等。應建立相應的標準操作規(guī)程來規(guī)范過濾器的使用，如安裝、系統(tǒng)連接、或、完整性測試等操作；應制定減菌過濾工藝的關(guān)鍵工藝參數(shù)，如過濾壓差，過濾時間等。
重復使用過濾器濾芯時，也應進行清洗效果，多（或）次數(shù)等驗證等。重復使用濾芯應對待過濾介質(zhì)無不良影響，不增加產(chǎn)品污染和交叉污染的風險。重復使用的濾芯不得用于不同種類的產(chǎn)品，應制定標準操作規(guī)程管理重復使用濾芯的清洗、、儲存、標識等重要事項。
?。?）微生物污染水平：存在于原料、原料藥起始物料、中間體或原料藥中微生物的種類及數(shù)量。
?。?）吸附：待過濾介質(zhì)中的某些成分粘附在濾膜（或濾器）上的過程，可能影響待過濾介質(zhì)的成分和濃度。
?。?）過濾器：根據(jù)ASTM 838-15，用挑戰(zhàn)水平大于等于1×107cfu/cm2有效過濾面積的缺陷型假單胞菌對過濾器進行挑戰(zhàn)，經(jīng)過適當驗證，可以穩(wěn)定重現(xiàn)產(chǎn)生無菌濾出液的過濾器。
?。?）冗余過濾：為降低過濾的風險而采用的一種多級過濾系統(tǒng)。即在終過濾器之前安裝一級已的級過濾器，并保證這兩級過濾器之間的無菌性。在冗余過濾系統(tǒng)中，靠近終灌裝點的一級一般稱為主過濾器。前面一級稱為冗余過濾器。在符合冗余過濾的條件下，當主過濾器完整性測試失敗時，冗余過濾器通過測試，產(chǎn)品仍可以接受。
?。?）完整性測試：與過濾器/過濾裝置的細菌截留能力相關(guān)的一種非破壞性物理測試。
?。?）無菌連接：在非無菌環(huán)境下連接兩個或多個獨立的系統(tǒng)而不破壞系統(tǒng)無菌性的連接方式。
?。?）屏障過濾器：同時含有疏水性和親水性濾膜，可同時過濾氣體和液體的過濾器。
?。?0）化學兼容性試驗：過濾器與被過濾介質(zhì)之間有無不良的反應和相互作用的測試。
?。?1）一次性過濾系統(tǒng)：一種過濾工藝設解決方案，通常由聚合材料組件裝配而成，形成一個完整的過濾系統(tǒng)，用于單次或一個階段性生產(chǎn)活動，單次使用后即拋棄。
?。?2）可提取物：在條件下（例如有機溶劑、高溫、離子強度、pH、接觸時間等），可以從過濾器及其他組件材料的工藝介質(zhì)接觸表面提取出的化學物質(zhì)。可提取物能夠表征大部分（但并非全部）在工藝介質(zhì)中可能的潛在浸出物。噴霧干燥
?。?3）差條件：導致工藝及產(chǎn)品失敗的概率高于正常工藝的條件或狀態(tài)，即標準操作規(guī)程范圍以內(nèi)工藝的上限和下限。但這類差條件不一定必然導致產(chǎn)品或工藝的不合格。
?。?4）浸出物：在存儲或常規(guī)工藝條件下，從接觸產(chǎn)品或非接觸產(chǎn)品的材料中遷移進入藥物產(chǎn)品或工藝流體中的化學物質(zhì)。浸出物可能是可提取物的一個子集，也可能包括可提取物的反應或降解后產(chǎn)物。
?。?5）模型溶劑：與實際藥品成分的物理、化學性質(zhì)相同或相似的萃取溶劑。實際藥品的pH、合適濃度的有機溶劑和有機溶質(zhì)均為模型溶劑選擇的依據(jù)。
?。?6）起泡點：氣體從被充分潤濕的多孔濾膜中的膜孔擠出并形成連續(xù)穩(wěn)定或大量的氣體時所需要的小壓力。
（17）擴散流前進流：施加一個低于起泡點的氣體壓力，氣體分子通過充分潤濕的膜孔擴散至濾膜下游的氣體流速。
?。?8）水侵入法測試：是在一定壓力下，測量干燥疏水性濾膜對水潤濕的抵抗力。即在低于水突破（水被壓通過）壓力下，測量少量但可測的液面下降所形成的“表觀”水流量。
（20）終：對完成終密封的產(chǎn)品進行處理，以使產(chǎn)品中微生物的存活概率（即無菌保證水平，SAL）不得高于10-6的生產(chǎn)方式。通常采用濕熱方法的標準時間F0值應大于8分鐘。流通蒸汽處理不屬于終。
為指導和規(guī)范無菌原料藥生產(chǎn)企業(yè)開展無菌工藝模擬驗證，充分評價無菌原料藥生產(chǎn)過程的無菌保障水平，確保無菌原料藥的安全性，依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》及附錄，制定本指南。
本指南所述的無菌工藝模擬試驗，是指采用適當?shù)呐囵B(yǎng)基或其他介質(zhì)，模擬原料藥生產(chǎn)中無菌操作的全過程，評價該工藝無菌保障水平的一系列活動。
3.1本指南涵蓋了無菌工藝模擬試驗的基本要求、不同工藝模式的相應要求、試驗的基本流程和結(jié)果評價等內(nèi)容，適用于無菌原料藥的無菌工藝驗證。
3.2本指南所述條款是在現(xiàn)有無菌工藝技術(shù)基礎上提出的相關(guān)要求，旨在規(guī)范企業(yè)開展無菌工藝模擬試驗活動。在科學的基礎上，鼓勵新技術(shù)、新設的引入，進一步提高無菌原料藥的無菌保障水平。
在對無菌生產(chǎn)工藝充分認知和生產(chǎn)經(jīng)驗累積的基礎上，應結(jié)合工藝、設、人員和環(huán)境等要素定期開展無菌工藝模擬試驗，以確認無菌生產(chǎn)過程的可靠性。同時也為企業(yè)及時識別風險，進而改進無菌控制措施提供數(shù)據(jù)支持。開展無菌工藝模擬試驗應遵循以下原則：
4.1 基于無菌工藝設計，對無菌生產(chǎn)全過程實施風險評估，識別生產(chǎn)過程風險點，評估現(xiàn)有控制措施的有效性。模擬試驗方案設計時，應充分考慮風險評估的結(jié)果。
4.2 應充分考慮硬件裝水平與無菌風險的關(guān)聯(lián)性，結(jié)合無菌生產(chǎn)過程所涉及到的工藝、設、人員以及操作時限等因素針對性開展模擬試驗，盡可能模擬實際無菌生產(chǎn)全過程，應特別關(guān)注暴露操作、人工干預等高風險過程。
4.3 如生產(chǎn)線有多種無菌生產(chǎn)工藝，應采用風險管理的模式，在綜合評價不同無菌生產(chǎn)工藝的基礎上設計模擬試驗方案，以評價每種無菌工藝過程的可靠性。
無菌原料藥的無菌生產(chǎn)工藝通常為：原料藥進一步精制和無菌操作的結(jié)合，作為無菌原料藥生產(chǎn)工藝的開始，多采用過濾或其他技術(shù)將物料中的微生物去除，之后采取無菌操作技術(shù)的工藝單元，終獲得免受微生物污染的原料藥。無菌工藝模擬試驗應從步無菌操作開始，即經(jīng)過濾或其他方法獲取無菌藥液，直至無菌產(chǎn)品密封結(jié)束。
與無菌制劑工藝相比，無菌原料藥的生產(chǎn)工藝一般更復雜，工藝設選型呈現(xiàn)出非標化和功能設計差異化等特點。即使是同一無菌工藝過程，因設選型和系統(tǒng)密閉程度的不同，無菌風險也存在著顯著差異。
目前，無菌原料藥常用無菌工藝包括：無菌結(jié)晶工藝、無菌冷凍工藝和無菌噴霧干燥工藝。
典型的無菌結(jié)晶工藝流程是從非無菌物料開始，經(jīng)過濾進入無菌結(jié)晶罐內(nèi)，通過調(diào)整物料溫度或加入其他溶劑使物料中有效活性成分結(jié)晶或沉淀析出，該過程會因控制晶體生長的需要而引入晶種。養(yǎng)晶結(jié)束后進入固液分離設，去除母液獲得濕品，必要時對濕品進行洗滌，濕品在固液分離設內(nèi)進行干燥或通過輔助密閉系統(tǒng)轉(zhuǎn)移至其他干燥設內(nèi)進行干燥，之后根據(jù)產(chǎn)品特性和終質(zhì)量要求進行必要的整粒（或微粉化），以控制產(chǎn)品粒度大小和分布，混粉也是常用的工藝單元，主要解決產(chǎn)品均一性的問題。后產(chǎn)品經(jīng)分裝、密封，將產(chǎn)品嚴封于容器內(nèi)。
常見的無菌凍干工藝流程包括：液體物料經(jīng)過濾得到無菌料液，在無菌防護下使用加料槍將無菌料液注入凍干機托盤內(nèi)，按照規(guī)定程序進行冷凍真空干燥，干燥結(jié)束后經(jīng)級呼吸器釋放凍干機內(nèi)的真空。在無菌防護下打開凍干機門，將干品由托盤轉(zhuǎn)移至無菌料倉內(nèi)，或在無菌防護下通過真空密閉吸料系統(tǒng)將干品轉(zhuǎn)移至下一工序，干品通常需要整粒和混粉工藝，以得到質(zhì)量均一的干品，后經(jīng)分裝、密封，將產(chǎn)品嚴封于容器內(nèi)。
無菌噴干工藝適用于耐熱性好的無菌原料藥，工藝流程通常包括：液體物料經(jīng)過濾后持續(xù)穩(wěn)定地注入干燥塔內(nèi)，在無菌高壓空氣的作用下瞬間霧化成液滴，并與流動的無菌熱空氣發(fā)生傳質(zhì)傳熱，液滴因水分迅速蒸發(fā)而變?yōu)榉勰罡善?，獲得的干品經(jīng)氣固分離器收集至無菌料倉內(nèi)，或直接分裝至終市售包裝內(nèi)。產(chǎn)品在料倉內(nèi)可實現(xiàn)進一步混粉操作，隨后經(jīng)分裝機完成干品的分裝、密封等過程，將產(chǎn)品嚴封于容器內(nèi)。
通常無菌工藝由一系列的無菌單元操作組成，單元操作分為“密閉”或“開放”系統(tǒng)，采用“密閉”系統(tǒng)可更好的保障無菌水平。
“密閉”系統(tǒng)是通過物理隔離的方式，阻止環(huán)境中微生物進入系統(tǒng)內(nèi)部，保護藥品免受外界的污染。因“密閉”系統(tǒng)設計上的性，在無菌操作過程提供了可靠的無菌保護措施。企業(yè)進行無菌原料藥工藝設計時，應盡量考慮采用“密閉”系統(tǒng)的可行性。“密閉”系統(tǒng)至少具以下特征：
5.4.1.1 能夠?qū)崿F(xiàn)在線（SIP）或系統(tǒng)在使用前進行密閉和。
5.4.1.2 能夠在一個生產(chǎn)周期內(nèi)保持系統(tǒng)的完整性。且在與其他密閉系統(tǒng)連接時，能夠保持系統(tǒng)完整性不受破壞。
“開放”系統(tǒng)是不符合“密閉”系統(tǒng)規(guī)定的一項或多項特征的系統(tǒng)，“開放”系統(tǒng)條件下進行的操作是影響終藥品無菌特性的重要環(huán)節(jié)，如設（或管道）的無菌連接、分裝過程容器的更換等，是引入微生物污染的高風險過程。模擬試驗方案設計時應重點考察以上過程中無菌保障措施的有效性。
模擬試驗是一個系統(tǒng)性工程，通過模擬無菌生產(chǎn)工藝全過程，證實生產(chǎn)過程中無菌保障措施的有效性。因此，模擬試驗實施應關(guān)注以下幾方面：
開展無菌工藝模擬試驗之前，應確認與無菌工藝相關(guān)的支持性系統(tǒng)和系統(tǒng)等驗證已完成，并達到了可接受的標準。
6.1.1工藝設、公用系統(tǒng)和輔助設施按照預期要求完成了設計、安裝、運行確認及與無菌生產(chǎn)有關(guān)的性能確認。
6.1.2已對工藝設、公用系統(tǒng)、輔助設施等的方法完成了相應的驗證，物料及房、設施所用劑及方式完成了相關(guān)的驗證。
6.1.3藥液及與產(chǎn)品接觸的氣體、設組件、容器具工藝完成了相應的驗證。
6.1.4無菌生產(chǎn)區(qū)域的氣流及環(huán)境達到了設計要求，并能穩(wěn)定運行。依據(jù)規(guī)定的方法和頻次進行環(huán)境，應避免劑的過度使用。
6.1.6參與無菌工藝模擬試驗的人員接受了藥品GMP、無菌更衣、無菌操作、微生物知識和模擬試驗方案的培訓。
6.1.7進入無菌潔凈區(qū)的全部人員通過了更衣程序的確認，并采取文件或其他措施，確定了每位參與者可進入的區(qū)域和允許的無菌操作項目。
模擬試驗方案設計應結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝，盡量與實際無菌操作過程保持一致，以求試驗結(jié)果真實反映生產(chǎn)過程的無菌保障水平。
無菌生產(chǎn)工藝的設計基于對產(chǎn)品特性、工藝技術(shù)和無菌保證措施的認知和經(jīng)驗的累積，設計模擬試驗方案前應對無菌生產(chǎn)工藝開展系統(tǒng)性風險評估，以充分識別無菌生產(chǎn)過程中潛在風險點，方案設計時充分考慮風險評估的結(jié)果。
6.2.2模擬試驗方案設計時，應重點考察和評估高風險無菌操作過程，如溶媒結(jié)晶工藝中引入晶種的過程。無菌生產(chǎn)工藝的暴露操作是影響終原料藥無菌特性的重要環(huán)節(jié)，如設（或管道）的無菌連接、無菌容器的轉(zhuǎn)運和更換、灌裝等關(guān)鍵操作。
6.2.3證實人員的無菌操作能力能夠滿足無菌生產(chǎn)要求，是實施模擬試驗的目的之一。模擬試驗方案設計時，應結(jié)合工藝過程中的開放系統(tǒng)，重點考察人員的無菌操作過程，評價人員無菌操作素養(yǎng)和防護措施的可靠性。
應考慮模擬介質(zhì)與無菌工藝的適宜性，結(jié)合被模擬產(chǎn)品的特點以及模擬介質(zhì)的可過濾性、澄清度、方式等方面選擇模擬介質(zhì)，以盡可能模擬無菌生產(chǎn)全過程。不應選擇明顯具有抑菌性的模擬介質(zhì)，以確保模擬試驗結(jié)果的可信度。通?？刹捎玫哪M介質(zhì)包括：促進微生物生長的培養(yǎng)基和安慰劑。
6.3.2.1 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）是一種廣譜性培養(yǎng)基，特別對無菌工藝環(huán)境中源自人體的細菌、芽孢和真菌有良好的促生長效果，是無菌工藝模擬試驗常用的培養(yǎng)基。
6.3.2.2 如果產(chǎn)品需充入惰性氣體、儲存在無氧條件，無菌操作在嚴格的厭氧環(huán)境中進行時（即氧氣濃度低于0.1%），應考慮采用厭氧培養(yǎng)基，如硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基（FTM），也可選擇其他適宜的培養(yǎng)基。在厭氧的無菌工藝環(huán)境監(jiān)控中反復發(fā)現(xiàn)厭氧微生物或在產(chǎn)品無菌檢查中發(fā)現(xiàn)厭氧微生物時，應考慮增加厭氧培養(yǎng)基開展模擬試驗。
6.3.2.3 用于模擬抑菌性產(chǎn)品的培養(yǎng)基，如有必要需評估抑菌性產(chǎn)品殘存對其促生長能力及模擬試驗結(jié)果的影響。
6.3.2.4 包含動物來源成分的培養(yǎng)基，應考慮培養(yǎng)基引入外源污染的風險。如BSE（可傳染性海綿腦?。?、TSE（瘋牛?。┑蕊L險，亦可選用植物來源的培養(yǎng)基。
6.3.3.1 模擬試驗的培養(yǎng)基應在適宜區(qū)域進行準，需注意培養(yǎng)基粉塵在環(huán)境中的擴散、殘留及去除，防止其殘存于環(huán)境及設表面而造成微生物滋生。通常按照藥典要求或商提供的配制方法配制培養(yǎng)基。配制后的培養(yǎng)基應盡快或過濾。
6.3.3.2 培養(yǎng)基在模擬試驗前應恢復至室溫，即用型無菌液體培養(yǎng)基儲存和使用條件應遵循生產(chǎn)商要求。
由于培養(yǎng)基的特性與藥液有差異，培養(yǎng)基過濾的濾器型號可與產(chǎn)品使用的過濾器不同。如因培養(yǎng)基顆?；蛏镓撦d較大等原因引起過濾器堵塞時，可增加預過濾。應考慮降低非無菌培養(yǎng)基中細菌和霉菌生長的風險，以避免微生物生長導致培養(yǎng)基過濾性能的降低。此外過濾的方式無法避免支原體污染，濕熱或輻照有助于降低該潛在風險，必要時可配合過濾聯(lián)合使用。針對以上情況應進行風險評估并采取合理應對措施。
在濕熱過程中應考慮避免受熱不均勻或不充分現(xiàn)象。應對該方式進行風險評估和驗證，也可使用無菌干粉或液體成品培養(yǎng)基。
過程應遵循生產(chǎn)商推薦的時間和溫度的建議，并對過程予以驗證。確保后培養(yǎng)基的促生長能力，避免過長時間及過熱使培養(yǎng)基碳化造成其促生長性能的降低，應進行促生長能力試驗。
使用輻照的培養(yǎng)基粉末，應在適宜環(huán)境下進行配制等操作。輻照過程應經(jīng)過驗證，并在產(chǎn)品質(zhì)量報告中體現(xiàn)驗證所用的菌種和劑量等信息。
6.3.5.1 應在無菌工藝模擬試驗前及14天培養(yǎng)后按照現(xiàn)行中國藥典方法對培養(yǎng)基進行促生長能力試驗。
6.3.5.2 按照中國藥典要求，培養(yǎng)基促生長能力試驗使用的菌種包括：白色念珠菌（CMCC98001）、黑曲霉（CMCC98003）、枯草芽孢桿菌（CMCC63501）、（CMCC26003）、銅綠假單胞菌（CMCC10104）和生孢梭菌（CMCC64941）等。除標準菌株之外，還可考慮加入環(huán)境和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。促生長試驗接種量應小于100CFU。按照中國藥典要求進行培養(yǎng)，證明培養(yǎng)基能夠支持微生物的生長。
對于無菌粉末及特殊產(chǎn)品，可根據(jù)產(chǎn)品特性、無菌工藝、生產(chǎn)設及模擬介質(zhì)特點，也可選用其他模擬介質(zhì)，如安慰劑。模擬介質(zhì)的流動性應盡可能類似于被模擬產(chǎn)品，易于灌裝/分裝等無菌操作。模擬介質(zhì)還應具有易于，無抑菌性，易溶解等特性。常用模擬介質(zhì)有聚乙二醇、乳糖、、氯化鈉、凡士林等。模擬介質(zhì)的過程應經(jīng)驗證并提供相關(guān)報告，其內(nèi)容包括方式對模擬介質(zhì)特性有無不良影響，后的無菌性。模擬介質(zhì)的包裝形式應與被模擬產(chǎn)品的包裝形式保持一致。
在使用模擬介質(zhì)前應對其適用性進行確認，包括抑菌試驗、溶解度試驗等，如選用無菌模擬介質(zhì)還應進行無菌試驗。抑菌試驗通常使用枯草芽孢桿菌（CMCC63501）和白色念珠菌（CMCC98001）。除此之外，還應考慮加入環(huán)境和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。無菌模擬介質(zhì)用無菌水分散后，加入到無菌培養(yǎng)基中，達到模擬工藝選用的濃度范圍，然后每份培養(yǎng)基中接種10-100CFU。陽性對照接種到不含無菌模擬介質(zhì)的試管中，按照現(xiàn)行中國藥典要求培養(yǎng)7天，所有試管應明顯微生物生長。
6.4.1 無菌工藝模擬灌裝的數(shù)量應足以保證評價的有效性及完成模擬方案中設計的各種干預活動，通常模擬灌裝的數(shù)量不宜低于正常生產(chǎn)分裝數(shù)量。
6.4.2 應對所設計的模擬方式、持續(xù)時間、灌裝的數(shù)量、預期收率作出合理說明。
6.4.3 模擬試驗所用模擬介質(zhì)的量，應能夠覆蓋無菌工藝設的全部內(nèi)表面，特別是混粉過程，應確保模擬介質(zhì)覆蓋混粉器內(nèi)壁全部表面。
6.4.4 考慮到模擬差條件的需要，模擬關(guān)鍵無菌操作過程的維持時間不應低于實際生產(chǎn)用時。
容器中培養(yǎng)基灌裝量應考慮適宜微生物生長的需要和容器內(nèi)表面覆蓋的要求，灌裝量不必與產(chǎn)品相同。適宜的裝量既可保證產(chǎn)品通過倒置和旋轉(zhuǎn)接觸到容器所有內(nèi)表面，又有足夠的氧氣支持微生物的生長。
通常無菌原料藥生產(chǎn)工藝由多個工藝單元構(gòu)成。模擬試驗方案的設計應考慮試驗過程可連續(xù)性問題，并確定采用連續(xù)工藝模擬還是分段模擬。
6.6.1.1 這種模擬方式是將整個無菌過程視為一個整體，模擬介質(zhì)不間斷地完成各個單元操作，并在終分裝容器內(nèi)進行無菌培養(yǎng)和判定，以評價生產(chǎn)過程的無菌保障水平。
6.6.1.2 連續(xù)工藝模擬方式的選擇，取決于模擬介質(zhì)在模擬過程中的適用性，如噴霧干燥工藝可采用液體模擬介質(zhì)，通過模擬噴霧干燥過程，可將液體模擬介質(zhì)轉(zhuǎn)化為固體模擬介質(zhì)，進而實現(xiàn)分裝、密封等過程的模擬。
6.6.1.3 連續(xù)工藝模擬可以真實反映整體無菌保障水平。但也有其不足之處，如發(fā)現(xiàn)污染，調(diào)查污染源的難度較大。
6.6.2.1 分段模擬方式是將無菌生產(chǎn)過程按照工藝單元分割成若干段，逐段進行模擬試驗，分段數(shù)量取決于工藝過程和模擬介質(zhì)。模擬試驗終的結(jié)果是各段獨立模擬試驗結(jié)果的累積，對一些無菌工藝而言，如結(jié)晶工藝，可根據(jù)需要變換采用液體或固體模擬介質(zhì)，保持與實際工藝過程的一致性。
6.6.2.2 分段工藝模擬的優(yōu)點是可以特定評價某一單元操作的無菌風險，如發(fā)現(xiàn)微生物污染，相對于連續(xù)工藝模擬更易于發(fā)現(xiàn)污染源，進而采取針對性糾正措施。
6.6.2.3 分段模擬方式也有不足之處，如：需要更多種類或數(shù)量的模擬介質(zhì)；模擬介質(zhì)需要多次無菌化處理，增加潛在污染風險；需要采集更多的物料、環(huán)境和人員監(jiān)測樣本進行評價。
差條件并不是指人為創(chuàng)造的超出允許范圍的生產(chǎn)狀況和環(huán)境。為了確認無菌工藝風險控制的有效性，應通過風險評估并結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝、設裝水平、人員數(shù)量和干預等因素來設計模擬試驗的差條件。包括但不限于以下方面：
應充分考慮人員及其活動對無菌生產(chǎn)工藝帶來的風險，如模擬生產(chǎn)過程的多人數(shù)，當操作人員數(shù)量減少可能導致其他方面污染風險增加時，則此類條件也視為差條件之一。參與人員應包括日常參與到無菌生產(chǎn)的全部人員，如生產(chǎn)操作、取樣、環(huán)境監(jiān)測和設設施維護人員，同時應考慮以上人員交叉作業(yè)、班次輪換、更衣、夜班疲勞狀態(tài)等因素。
應適當考慮模擬實際生產(chǎn)操作過程中房間、設、物料或后放置的長時間及長的工藝保留時限等，如：混粉或分裝前的等待時限。
模擬試驗應涵蓋產(chǎn)品實際灌裝速度范圍，基于無菌風險的角度分析評價灌裝速度對工藝過程及其他方面的影響程度。如模擬長的暴露時間或模擬操作強度/難度。
6.7.4.1模擬試驗挑戰(zhàn)的差環(huán)境，應考慮選擇無菌生產(chǎn)周期的末端，或連續(xù)生產(chǎn)期間，環(huán)境周期性內(nèi)長的時間間隔。
6.7.4.2 日常生產(chǎn)中，針對微生物污染事件而制定了糾正措施。在模擬試驗時，應對糾正措施的有效性給予確認。
干預是指由操作人員按照相關(guān)規(guī)定參與無菌工藝生產(chǎn)有關(guān)的所有操作活動。干預可分為固有干預和糾正性干預。固有干預是指常規(guī)和有計劃的無菌操作，如環(huán)境監(jiān)控、設安裝或容器更換等；糾正性干預是指對無菌生產(chǎn)過程的糾正或調(diào)整，如更換部件、設故障排除等。
無菌生產(chǎn)過程各種允許的干預活動應該文件化，明確規(guī)定正常生產(chǎn)活動和干預活動，模擬試驗中干預設計應與實際的生產(chǎn)活動保持一致，模擬試驗不應挑戰(zhàn)不合理的干預，以證明其合理性。在模擬試驗方案中應制定干預清單和實施計劃，模擬試驗時逐一實施并記錄。
6.8.3.1 模擬試驗方案中應明確規(guī)定固有干預和糾正性干預（如維修、故障停機、設調(diào)試）的類型、頻次。
6.8.3.2 固有干預及經(jīng)常發(fā)生的糾正性干預應在每次模擬中都實施，偶發(fā)性的干預可周期性的模擬。如無菌生產(chǎn)過程意外暫停或重啟、無菌狀態(tài)下設、設施偶發(fā)故障排除等。
6.8.3.3 模擬試驗應設計并實施足夠多的糾正性干預。干預頻次的設計應考慮生產(chǎn)過程按比例覆蓋模擬試驗的全過程。
6.8.3.4 對于無菌取樣過程，應考慮分布在分裝的前、中、后階段，調(diào)整裝量、取樣、重復密封過程均應考慮模擬，并為生產(chǎn)過程中處理該類問題提供參考。
實施干預的人員（應包括操作、維修人員等）應經(jīng)過相關(guān)的培訓和考核，能夠按規(guī)定的程序?qū)嵤└鞣N干預。標準化的固有干預可由部分操作人員實施并據(jù)此評價其他人。對于復雜操作，如分裝機裝配或故障排除等，每個從事此類操作的人員都應在試驗過程進行模擬，操作條件不應優(yōu)于日常生產(chǎn)的操作條件。
實際工藝中如明確規(guī)定受干預影響的產(chǎn)品（容器）應從生產(chǎn)線上剔除，在模擬試驗時也可剔除，模擬試驗時產(chǎn)生的這類產(chǎn)品（容器）可不培養(yǎng)。無需培養(yǎng)的培養(yǎng)基應予以記錄并評估其合理性。如在干預發(fā)生前已經(jīng)密封，但在日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗時也應保留、培養(yǎng)并納入評估。
模擬試驗過程中的所有干預必須記錄，用以評估干預對無菌保證的影響。糾正性干預記錄的內(nèi)容至少應包括糾正性干預的類型、位置、次數(shù)；固有干預記錄至少包括干預內(nèi)容和發(fā)生頻率等信息。
對于生產(chǎn)線存在多種相似的容器規(guī)格（如：同一品種的不同容器規(guī)格）時，應通過風險評估選擇模擬的容器規(guī)格，通常選擇小和尺寸的容器進行模擬。特殊規(guī)格的容器應考慮單獨進行模擬。
無菌工藝模擬試驗結(jié)束后，應對所使用的模擬介質(zhì)（培養(yǎng)基、安慰劑）進行全部處理和培養(yǎng)。非培養(yǎng)基模擬介質(zhì)可通過適當?shù)臒o菌過濾器系統(tǒng)將微生物轉(zhuǎn)移至濾膜或其他便于培養(yǎng)、觀察的介質(zhì)上，之后濾膜或其他介質(zhì)浸入培養(yǎng)基內(nèi)進行培養(yǎng)；也可在終包裝容器內(nèi)加注無菌培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。培養(yǎng)基的濃度應能支持潛在微生物的生長，如：TSB一般濃度控制在3%水平。
6.10.2.1 應對容器翻轉(zhuǎn)、倒置等，確保培養(yǎng)基接觸容器（包括密封件）的所有內(nèi)表面。培養(yǎng)時間至少14天?？蛇x擇兩個溫度進行培養(yǎng)：在20℃-25℃培養(yǎng)至少7天，然后在30℃-35℃培養(yǎng)至少7天。如選擇其他培養(yǎng)計劃，應有試驗數(shù)據(jù)支持所選培養(yǎng)條件的適用性。在整個培養(yǎng)期間應連續(xù)監(jiān)控培養(yǎng)溫度。
6.10.2.2 如實際生產(chǎn)過程中，分裝容器內(nèi)需要填充惰性氣體，在模擬試驗過程應考慮用無菌空氣替代，避免影響微生物生長。
6.10.2.3 如必須采用惰性氣體用于模擬厭氧無菌工藝（氧氣濃度低于0.1%）及培養(yǎng)厭氧微生物，應確認惰性氣體與所選培養(yǎng)基的組合，能夠支持微生物的生長。
6.10.3.1 培養(yǎng)結(jié)束后，應對所有模擬灌裝產(chǎn)品逐一進行無菌性檢查，通常應在合適的照度下進行目視觀察。
6.10.3.2 在培養(yǎng)期間定期觀察培養(yǎng)基的培養(yǎng)情況，如在培養(yǎng)期間發(fā)現(xiàn)異常情況時應進行進一步調(diào)查。如在檢查中發(fā)現(xiàn)密封缺陷的灌裝產(chǎn)品，應進行適當?shù)脑蛘{(diào)查并采取糾正措施。
6.10.3.3 培養(yǎng)容器不透明時，應考慮將轉(zhuǎn)移至透明容器觀察，以確保有陽性時能被觀察到。
為保證模擬試驗結(jié)果的可靠性，應對各階段灌裝數(shù)量進行準確計數(shù)，如灌裝數(shù)量、干預剔除數(shù)量、培養(yǎng)前數(shù)量和培養(yǎng)后無菌檢查數(shù)量，各階段數(shù)量應平衡。如發(fā)現(xiàn)不平衡，應調(diào)查原因并判斷本次模擬試驗結(jié)果的有效性。
應通過風險評估確定日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控的各要素，如取樣點、取樣對象、取樣頻率、警戒和糾偏標準、實施方法等。模擬試驗時應采用與日常生產(chǎn)相同的環(huán)境監(jiān)控方案為基礎，模擬生產(chǎn)狀況，包括采樣儀器、耗材的轉(zhuǎn)移、等，任何異于日常環(huán)境監(jiān)控的情況都應有說明和記錄。
與實際生產(chǎn)過程相比，模擬試驗中的環(huán)境監(jiān)控應考慮增加額外的監(jiān)測環(huán)節(jié)，如人員監(jiān)測。
6.12.2.1 環(huán)境（包括人員）監(jiān)控的數(shù)據(jù)結(jié)果用于評估模擬生產(chǎn)過程中的環(huán)境條件是否適宜于生產(chǎn)。當模擬試驗出現(xiàn)陽性結(jié)果時，環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)可用于進行根本原因的調(diào)查。
6.12.2.2 模擬試驗時發(fā)生的環(huán)境偏差并不是模擬試驗成功的否決條件，是否通過試驗取決于調(diào)查的結(jié)果。環(huán)境監(jiān)測結(jié)果異常時，即使試驗結(jié)果成功，也應進行必要的調(diào)查和糾正。即使終決定在環(huán)境監(jiān)控結(jié)果超出糾偏標準時無菌工藝模擬試驗依然通過，也不意味著日常生產(chǎn)可以在同等環(huán)境偏差的條件下進行。
所有被進行無菌操作的人員，包括生產(chǎn)操作人員、監(jiān)督人員和維修人員等，每年至少參與一次成功的無菌工藝模擬試驗。
7.1 應采用定性標準判定模擬試驗結(jié)果，定性標準意味著模擬試驗只接受的結(jié)果，排除了定量標準中識別微生物污染來源的困惑和潛在不確定性風險。
7.2 應通過評估確定模擬介質(zhì)的預期收率，并作為模擬試驗結(jié)果可接受標準之一。
8.1 無菌工藝模擬試驗存在污染，即意味著無菌保證可能存在問題，出現(xiàn)的任何污染樣品均應視為偏差并調(diào)查，并為改進無菌工藝提供數(shù)據(jù)支持。
8.2 可通過查看無菌工藝模擬試驗的錄像或現(xiàn)場記錄，還原模擬試驗過程中人員操作行為、干預及設運行等狀況，有利于分析問題的來源。對無菌工藝模擬試驗實施過程相關(guān)的所有記錄進行詳細調(diào)查，并關(guān)注各種偏差、驗證、變更等，所有偏離原始驗證狀態(tài)情況均應逐一評估并說明。檢查所有相關(guān)人員的培訓和資質(zhì)確認記錄。
8.3 建議對模擬試驗中發(fā)現(xiàn)的微生物進行鑒別，以便開展污染途徑的調(diào)查，并列入企業(yè)微生物菌種庫。
8.4 調(diào)查的關(guān)鍵是查找污染來源，結(jié)合調(diào)查需要，應制定一個完整的取樣和微生物鑒別計劃，調(diào)查過程應有記錄并歸檔。調(diào)查結(jié)果應形成書面報告并得到質(zhì)量管理部門的批準。
8.5 如調(diào)查找到指定的原因，應制定糾正預防措施，并再次進行模擬試驗，以證明措施的有效性。如調(diào)查無指定原因，應對生產(chǎn)工藝過程的無菌控制開展系統(tǒng)性評估，在現(xiàn)有模擬試驗方案的基礎上增加取樣點和頻次，以獲得更多數(shù)據(jù)支持原因調(diào)查，同時應適當增加試驗批次。
9.1 新建無菌生產(chǎn)線，在正式投產(chǎn)前，每班次應當連續(xù)進行3次合格的模擬試驗。
9.2 正常生產(chǎn)中，每班次每半年應至少進行一次模擬試驗。對于因停產(chǎn)的生產(chǎn)線，在恢復正式生產(chǎn)前應考慮進行無菌工藝模擬試驗。
9.3 空氣凈化系統(tǒng)、無菌生產(chǎn)用設設施、無菌工藝及人員重大變更或設的重大維修后，應進行風險評估確認再模擬試驗批次。
9.4 應充分評估生產(chǎn)線的風險，在發(fā)現(xiàn)設施、人員、環(huán)境或工藝的持續(xù)監(jiān)測出現(xiàn)不良趨勢或無菌不合格時，也應考慮再次進行模擬試驗。
無菌工藝模擬試驗雖然基于無菌風險而開展的，但考慮到每次無菌操作過程的性，成功的無菌工藝模擬試驗是允許正式生產(chǎn)的必要條件，但應注意其局限性。
10.1 以現(xiàn)行藥品GMP法規(guī)要求為準則，評價無菌生產(chǎn)過程的法規(guī)符合性，低于規(guī)范要求的無菌工藝過程，不能通過模擬試驗來證實其無菌控制的合理性。
10.2 雖然可通過培養(yǎng)基模擬灌裝試驗來評估無菌生產(chǎn)工藝的可靠性。但當產(chǎn)品無菌檢查出現(xiàn)陽性時，不能以模擬試驗結(jié)果，排除生產(chǎn)過程所帶來的污染可能性。
10.3 模擬試驗過程引入了模擬介質(zhì)，存在殘留或促進微生物滋生的潛在風險。因此，模擬試驗完成后模擬介質(zhì)應進行清潔和有效性確認。
無菌工藝：物料、器具經(jīng)過處理，并在無菌防護下加工獲得終產(chǎn)品，且產(chǎn)品裝入其終容器后不再進行任何處理。
無菌工藝模擬試驗：用模擬介質(zhì)代替產(chǎn)品，模擬無菌工藝過程，來評估無菌生產(chǎn)過程的無菌保障水平。
“密閉”系統(tǒng)：是指系統(tǒng)在使用前采用經(jīng)驗證的程序進行在線或密閉后，并在一個完整生產(chǎn)周期內(nèi)能夠耐受壓力或真空，系統(tǒng)泄漏率維持在規(guī)定范圍內(nèi)，以保證系統(tǒng)的完整性。
模擬介質(zhì)：可用于替代無菌原料藥模擬無菌工藝過程的物料，如培養(yǎng)基、安慰劑等。
安慰劑：是一種“模擬的無菌原料藥”。其物理特性與無菌原料藥相似，但無促生長作用。
差狀況：一組條件，包括工藝限度和環(huán)境限度，也包括那些可能引起工藝或產(chǎn)品失敗的機會，但這些條件不一定會引起產(chǎn)品或工藝失敗。
為指導和規(guī)范無菌制劑生產(chǎn)企業(yè)開展無菌工藝模擬試驗，充分評價無菌制劑產(chǎn)品生產(chǎn)過程的無菌保障水平，確保無菌制劑的安全性，依據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）》及附錄，制定本指南。
本指南所述的無菌工藝模擬試驗，是指采用適當?shù)呐囵B(yǎng)基或其他介質(zhì)，模擬制劑生產(chǎn)中無菌操作的全過程，評價該工藝無菌保障水平的一系列活動。
3.1本指南涵蓋了無菌工藝模擬試驗的基本要求、不同工藝模式的相應要求、試驗的基本流程和結(jié)果評價等內(nèi)容，適用于無菌制劑的無菌工藝驗證。
3.2本指南所述條款是在現(xiàn)有無菌工藝技術(shù)基礎上提出的相關(guān)要求，旨在規(guī)范企業(yè)開展無菌工藝模擬試驗活動。在科學的基礎上，鼓勵新技術(shù)、新設的引入，進一步提高無菌制劑的無菌保障水平。
在對無菌生產(chǎn)工藝充分認知和生產(chǎn)經(jīng)驗累積的基礎上，應結(jié)合工藝、設、人員和環(huán)境等要素定期開展無菌工藝模擬試驗，以確認無菌生產(chǎn)過程的可靠性。開展無菌工藝模擬試驗應遵循以下原則：
4.1對無菌生產(chǎn)過程實施風險評估，識別生產(chǎn)過程風險點。評估結(jié)果應在試驗方案設計時給予考慮。
4.2應充分考慮硬件裝水平與無菌風險的關(guān)聯(lián)性，結(jié)合無菌生產(chǎn)過程所涉及到的工藝、設、人員以及操作時限等因素針對性開展模擬試驗。盡可能模擬實際無菌生產(chǎn)全過程。應特別關(guān)注暴露操作、人工干預等高風險過程。采用良好設計且受控的無菌灌裝系統(tǒng)，特別是自動化的系統(tǒng)如吹灌封、隔離器等，污染率可大幅度降低。
4.3如在同一生產(chǎn)線生產(chǎn)不同劑型和容器規(guī)格的產(chǎn)品，應考慮模擬試驗方案對各產(chǎn)品無菌工藝過程的適用性。應對有顯著差異的無菌工藝過程開展模擬試驗。采用風險評估的方式統(tǒng)籌考慮該生產(chǎn)線生產(chǎn)使用的容器類型、規(guī)格大小，產(chǎn)品類別，灌裝速度、過程中斷等環(huán)節(jié)，進行試驗方案的設計。
無菌生產(chǎn)工藝通常包含：經(jīng)過濾或其他方法獲取無菌藥液或無菌粉末，在無菌條件下進行液體灌裝或粉末分裝，容器密封。凍干制劑在液體灌裝的基礎上增加了冷凍干燥過程。
無菌工藝模擬試驗應從無菌操作的步開始，直至無菌產(chǎn)品密封結(jié)束。如果在產(chǎn)品制階段采用了無菌工藝，此部分工藝也應作為模擬驗證的一部分。對于全過程無菌生產(chǎn)（如配制后不能過濾）的產(chǎn)品，無菌工藝模擬還應涵蓋原液配制、半成品配制等無菌操作過程。企業(yè)應根據(jù)風險評估確定無菌工藝模擬試驗的起始工序。
模擬試驗是一個系統(tǒng)性工程，通過模擬無菌生產(chǎn)工藝全過程，證實生產(chǎn)過程中無菌保障措施的有效性。應從以下幾方面關(guān)注模擬試驗的設計與實施：
在無菌工藝模擬試驗之前應確認與無菌工藝相關(guān)的支持性系統(tǒng)和系統(tǒng)等驗證已完成，并達到了可接受的標準。
6.1.1工藝設、公用系統(tǒng)和輔助設施已按照預期完成了設計、安裝、運行確認及與無菌生產(chǎn)有關(guān)的性能確認。
6.1.2已對工藝設、公用系統(tǒng)、輔助設施，如高壓設、配液罐、隧道烘箱等的方法完成了相應的驗證。物料及房、設施所使用劑及方式完成了相關(guān)的驗證。
6.1.3藥液及產(chǎn)品接觸的氣體、設組件、容器、器具等工藝或工藝的驗證已經(jīng)完成。
6.1.4無菌生產(chǎn)區(qū)域的氣流及環(huán)境達到了設計要求，并能穩(wěn)定運行。但不得采用對環(huán)境或者器具進行過度或的方式提高無菌保證水平。
6.1.6參與無菌工藝模擬試驗的人員接受了藥品GMP、無菌更衣、無菌操作、微生物知識的培訓以及通過實施模擬試驗資格的確認。
6.1.7進入無菌潔凈區(qū)的全部人員通過了更衣程序的確認，并采用文件或其他措施，確認了每位參與者可進入的區(qū)域和其所允許的無菌操作項目。
模擬試驗方案設計應結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝，盡量與實際無菌操作過程保持一致，以求試驗結(jié)果真實反映生產(chǎn)過程的無菌保障水平。
無菌生產(chǎn)工藝的設計基于對產(chǎn)品特性、工藝技術(shù)和無菌保證措施的認知和經(jīng)驗的累積。設計模擬試驗方案前應對無菌生產(chǎn)過程開展系統(tǒng)性風險評估，以充分識別無菌生產(chǎn)過程中潛在風險點。
6.2.2模擬試驗方案設計時，應重點考察和評估高風險的無菌操作過程。無菌生產(chǎn)工藝的暴露操作是影響終產(chǎn)品無菌特性的重要環(huán)節(jié)，如設（或管道）的無菌連接、無菌容器的轉(zhuǎn)運和更換、灌裝等關(guān)鍵操作。模擬試驗方案設計應考察以上過程無菌保證措施的有效性。
6.2.3證實人員的無菌操作能力能夠滿足無菌生產(chǎn)要求，是實施模擬試驗的目的之一。進行模擬試驗方案設計時，應結(jié)合工藝過程中的暴露操作環(huán)節(jié)，重點考察有人員參與的關(guān)鍵操作，評價人員無菌操作素養(yǎng)和防護措施的可靠性。
應結(jié)合被模擬產(chǎn)品的特點以及模擬介質(zhì)的可過濾性、澄清度、方式等選擇合適的模擬介質(zhì)。不應選擇具有抑菌性的模擬介質(zhì)，以確保模擬試驗結(jié)果的可信度。通?？刹捎玫哪M介質(zhì)包括促進微生物生長的培養(yǎng)基和安慰劑。
6.3.2.1 胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基（TSB）是一種廣譜性培養(yǎng)基，特別對無菌工藝環(huán)境中源自人體的細菌、芽孢和真菌有良好的促生長效果，是無菌工藝模擬試驗常用的培養(yǎng)基。
6.3.2.2 如果產(chǎn)品需充入惰性氣體、儲存在無氧條件，無菌操作在嚴格的厭氧環(huán)境中進行時（即氧氣濃度低于0.1%）。應評估是否采用厭氧培養(yǎng)基，如硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基（FTM）或其他適宜的培養(yǎng)基。在厭氧的無菌工藝環(huán)境監(jiān)控中反復發(fā)現(xiàn)厭氧微生物或在產(chǎn)品無菌檢查中發(fā)現(xiàn)厭氧微生物時，需評估增加厭氧培養(yǎng)基。
6.3.2.3 用于模擬抑菌性產(chǎn)品的培養(yǎng)基，如有必要需評估抑菌性產(chǎn)品殘存對其促生長能力及模擬試驗結(jié)果的影響。
6.3.2.4 對于包含動物來源成分的培養(yǎng)基，應考慮培養(yǎng)基引入外源性病毒污染的風險，如BSE（可傳染性海綿腦?。?TSE（瘋牛病）的風險，亦可選用植物來源的培養(yǎng)基。
6.3.3.1模擬試驗的培養(yǎng)基應在適宜區(qū)域進行準，需注意培養(yǎng)基粉塵在環(huán)境中的擴散，以及設表面的殘留引發(fā)的微生物滋生。通常按照藥典要求或商提供的配制方法配制培養(yǎng)基。配制后的培養(yǎng)基應盡快或過濾。
6.3.3.2培養(yǎng)基在模擬試驗前應恢復至室溫。即用型無菌液體培養(yǎng)基儲存條件和使用條件可遵循生產(chǎn)商要求。
由于培養(yǎng)基的特性與藥液有差異，培養(yǎng)基過濾的濾器型號可與產(chǎn)品使用的過濾器不同。如因顆?；蛏镓撦d較大等原因引起過濾器的堵塞時，可增加預過濾步驟。
需考慮降低非無菌培養(yǎng)基中細菌和霉菌生長的風險，以避免微生物生長導致培養(yǎng)基過濾性能降低。此外過濾的方式無法避免支原體污染，濕熱或輻照有助于降低該潛在風險，必要時可配合過濾聯(lián)合使用。
6.3.4.2.1 在濕熱過程中，應考慮避免受熱不均勻或不充分現(xiàn)象，應對該方式進行風險評估和驗證，亦可使用無菌干粉或液體成品培養(yǎng)基。
6.3.4.2.2 過程應遵循生產(chǎn)商推薦的時間和溫度的建議，并對過程予以驗證。確保后培養(yǎng)基的促生長能力，避免過長時間及過熱使培養(yǎng)基碳化造成其促生長性能的降低，應進行促生長能力試驗。
使用輻照的培養(yǎng)基粉末，在適宜環(huán)境下進行配制等操作。輻照過程應經(jīng)驗證，并在產(chǎn)品質(zhì)量報告中體現(xiàn)驗證中所用的菌種和劑量等信息。
6.3.5.1應考慮在無菌工藝模擬試驗開始前及14天培養(yǎng)后按照現(xiàn)行中國藥典方法對培養(yǎng)基進行促生長試驗。
6.3.5.2根據(jù)所選擇的培養(yǎng)基，按照中國藥典要求進行促生長能力試驗使用的菌種包括：白色念珠菌（CMCC98001）、黑曲霉（CMCC98003）、枯草芽孢桿菌（CMCC63501）、（CMCC26003）、銅綠假單胞菌（CMCC10104）和生孢梭菌（CMCC64941）（必要時）等。除標準菌株之外，還可考慮加入環(huán)境監(jiān)測和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。促生長試驗接種量應小于100CFU，按照中國藥典要求培養(yǎng)，以證明培養(yǎng)基能夠支持微生物的生長。
無菌粉末產(chǎn)品及特殊劑型產(chǎn)品，如懸濁液、軟膏/乳膏/乳液/凝膠等，在無菌工藝模擬試驗中會使用其他模擬介質(zhì)，如安慰劑等。應根據(jù)劑型特點、生產(chǎn)工藝及設選擇適當?shù)哪M介質(zhì)。
模擬介質(zhì)的流動性應類似于被模擬產(chǎn)品，易于進行灌裝/分裝等工藝操作。模擬介質(zhì)還應具有易于，無抑菌性，易溶解等特性。常用模擬介質(zhì)有聚乙二醇、乳糖、、氯化鈉、凡士林等。模擬介質(zhì)的過程應經(jīng)驗證并提供相關(guān)報告，其內(nèi)容包括方式對模擬介質(zhì)特性有無不良影響，后的無菌性。模擬介質(zhì)的包裝形式應與被模擬物的包裝形式一致或能充分代表該種包裝形式。
在使用模擬介質(zhì)前應對其適用性進行確認，包括無菌試驗、抑菌試驗、溶解度試驗等。抑菌試驗通常使用枯草芽孢桿菌（CMCC63501）和白色念珠菌（CMCC98001）。除此之外，還應考慮加入環(huán)境和無菌檢查中發(fā)現(xiàn)的典型微生物。無菌模擬介質(zhì)由無菌注射用水分散，然后加入到無菌培養(yǎng)基中，達到模擬工藝選用的濃度范圍，然后在每份培養(yǎng)基中接種10-100CFU。陽性對照接種到不含無菌模擬介質(zhì)的試管中，參照現(xiàn)行中國藥典要求，培養(yǎng)7天所有試管應明顯渾濁。
6.4.1無菌工藝模擬灌裝數(shù)量應足以保證評價的有效性及完成模擬方案中設計的各種干預活動。應通過風險評估對所設計的灌裝數(shù)量、持續(xù)時間、模擬方式、預期收率作出合理說明。
6.4.2生產(chǎn)批量小于5000支，模擬灌裝批量至少與生產(chǎn)批量相同；產(chǎn)品的生產(chǎn)批量在5000支至10000支，模擬灌裝數(shù)量應與產(chǎn)品實際的生產(chǎn)批量相當；大規(guī)模生產(chǎn)，即產(chǎn)品的生產(chǎn)批量大于10000支，模擬灌裝數(shù)量應不得低于10000支；對于超大批量的生產(chǎn)規(guī)模，例如大于100000支，則應考慮適當增加模擬的灌裝數(shù)量；如采用密封性生產(chǎn)設，可適當降低模擬數(shù)量。
容器中培養(yǎng)基灌裝體積應考慮適宜微生物生長的需要和容器內(nèi)表面覆蓋的要求，灌裝體積不必與產(chǎn)品相同，但合適的灌裝量既應保證產(chǎn)品通過倒置和旋轉(zhuǎn)接觸到所有內(nèi)表面并有足夠的氧氣支持微生物的生長，又應利于對培養(yǎng)基的觀察。
在灌裝培養(yǎng)基期間應模擬所有類型和規(guī)定數(shù)量的干預。模擬試驗應包含生產(chǎn)的初始、結(jié)束階段和干預發(fā)生的時刻。大規(guī)模生產(chǎn)時，模擬試驗方法可采用但不限于以下幾種方式：
模擬試驗的持續(xù)時間和實際生產(chǎn)相當，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實際批量，模擬試驗在培養(yǎng)基灌裝和空瓶運行間切換。在正常生產(chǎn)條件下應模擬灌裝足夠數(shù)量的培養(yǎng)基瓶子，以保證能夠準確反映實際生產(chǎn)的污染風險。在不灌裝培養(yǎng)基期間，灌裝線穿插運行空容器。該方式能全面評估人員、操作和生產(chǎn)環(huán)境。
模擬試驗的持續(xù)時間和實際生產(chǎn)相當，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實際批量，模擬驗證在培養(yǎng)基灌裝和注射用水灌裝間切換。此種方式比實際生產(chǎn)更復雜，同時存在注射用水稀釋部分培養(yǎng)基導致促生長性能下降的風險，應通過促生長試驗證明其有效性。
模擬試驗的持續(xù)時間和實際生產(chǎn)相當，培養(yǎng)基灌裝數(shù)量少于實際批量，模擬試驗在培養(yǎng)基灌裝和設空轉(zhuǎn)運行間切換。應模擬足夠數(shù)量的培養(yǎng)基產(chǎn)品，以保證能夠準確反映實際生產(chǎn)的污染風險。在不灌裝培養(yǎng)基期間灌裝線繼續(xù)空轉(zhuǎn)運行，模擬正常生產(chǎn)操作狀態(tài)。該方式也能全面評估人員、操作和生產(chǎn)環(huán)境。
這是在一批產(chǎn)品生產(chǎn)結(jié)束后，直接進行培養(yǎng)基灌裝的方式，如果采用該方式應注意相關(guān)風險。此方式因存在局限性，可作為一種補充方式，仍應對設組裝、啟動和開始灌裝等無菌操作進行模擬。對于可能產(chǎn)生抑菌性影響的情況，不推薦使用本方式。
差條件并不是指人為創(chuàng)造的超出允許范圍的生產(chǎn)狀況和環(huán)境。為了確認無菌工藝風險控制的有效性，應通過風險評估并結(jié)合無菌生產(chǎn)工藝、設裝水平、人員數(shù)量和干預等因素來設計模擬試驗差條件。包括但不限于以下方面：
應充分考慮人員及其活動對無菌生產(chǎn)工藝帶來的風險。如模擬生產(chǎn)過程的多人數(shù)，當操作人員數(shù)量減少可能導致其他方面污染風險增加時，則此類條件也視為差條件之一。參與人員應包括日常參與到無菌生產(chǎn)的全部人員，如生產(chǎn)操作、取樣、環(huán)境監(jiān)測和設設施維護人員，同時應考慮以上人員交叉作業(yè)、班次輪換、更衣、夜班疲勞狀態(tài)等因素。
在條件允許的情況下，適當考慮模擬實際生產(chǎn)操作過程中房間、設、物料或后放置的長時間及長的工藝保留時限等，如設設施、分裝容器、無菌器具后長的放置時間等。
模擬試驗應涵蓋產(chǎn)品實際灌裝速度范圍，基于無菌風險的角度分析評價灌裝速度對工藝過程及其他方面的影響程度。例如采用慢的灌裝速度、的容器用以模擬長暴露時間；或采用快的灌裝速度、小的容器時，用以模擬操作強度/難度。
無菌工藝模擬試驗期間環(huán)境的處理應依據(jù)正常生產(chǎn)期間的方法進行，避免過度及劑的過度使用。
干預是指由操作人員按照相關(guān)規(guī)定參與無菌工藝生產(chǎn)的所有操作活動。干預可分為固有干預和糾正性干預。固有干預是指常規(guī)和有計劃的無菌操作，如裝載膠塞，環(huán)境監(jiān)控，設安裝等；糾正性干預是指對無菌生產(chǎn)過程的糾正或調(diào)整，如生產(chǎn)過程中清除破碎的瓶子，排除卡住的膠塞，更換部件、設故障排除等。
應對無菌生產(chǎn)過程中各種允許的干預活動進行文件化管理，明確規(guī)定正常生產(chǎn)中允許的干預活動。模擬試驗中干預設計應與實際的生產(chǎn)活動保持一致，模擬試驗不應挑戰(zhàn)不合理的干預，以證明其合理性。在模擬試驗方案中應制定干預清單和實施計劃，模擬試驗時逐一實施并記錄。
6.8.3.1無菌模擬試驗方案中應明確規(guī)定固有干預、糾正性干預的頻次、類型及復雜程度（如簡單干預：倒瓶剔除等；復雜干預：灌裝機泵及針頭裝配、設故障維修等）。
6.8.3.2固有干預及經(jīng)常發(fā)生的糾正性干預一般應在每次模擬中都實施，偶發(fā)性的干預可周期性地模擬，如無菌生產(chǎn)過程意外暫?；蛑貑ⅰo菌狀態(tài)下設、設施偶發(fā)故障排除等。
6.8.3.3模擬試驗應設計并實施足夠數(shù)量的糾正性干預。干預頻次的設計應考慮實際生產(chǎn)情況，按比例覆蓋模擬試驗的全過程。
6.8.3.4對于無菌取樣、調(diào)整裝量過程，均應考慮在分裝的前、中、后階段進行。
實施干預的人員（應包括操作、維修人員等）應經(jīng)過相關(guān)的培訓和考核，并能按規(guī)定的程序?qū)嵤└鞣N干預。標準化的、簡單的固有干預可由部分操作人員實施并據(jù)此評價其他人。對于復雜操作，如裝配灌裝機等，每個從事該操作的人員都應在驗證過程中模擬，操作條件不應優(yōu)于日常生產(chǎn)的操作條件。
實際工藝中如明確規(guī)定受干預影響的產(chǎn)品（容器）應從生產(chǎn)線上剔除，在模擬試驗時也可剔除。模擬試驗時產(chǎn)生的這類產(chǎn)品（容器）可不培養(yǎng)，但不培養(yǎng)的容器應予以記錄并評估其合理性。如在干預發(fā)生前已經(jīng)密封，在日常生產(chǎn)中按規(guī)定不需要剔除的產(chǎn)品，模擬試驗時也應保留、培養(yǎng)并納入評估。
模擬試驗過程中的所有干預必須記錄。糾正性干預記錄的內(nèi)容至少應包括糾正性干預的類型、位置、次數(shù)；固有干預記錄至少包括干預內(nèi)容和發(fā)生頻率。
一條灌裝線上有多種規(guī)格容器時，應進行風險評估選擇模擬的容器。一般選擇小和/或尺寸的容器進行培養(yǎng)基灌裝模擬試驗。通常采用無色透明的容器代替不透明或棕色的容器。
模擬試驗中密封缺陷產(chǎn)品的剔除工藝應采用日常生產(chǎn)的剔除工藝。噴霧干燥除密封缺陷的產(chǎn)品外，其他外觀缺陷、灌裝量異常的模擬產(chǎn)品也應進行培養(yǎng)。
6.10.2.1在培養(yǎng)前，一般應對模擬灌裝產(chǎn)品進行顛倒、輕搖以使培養(yǎng)基接觸所有內(nèi)表面，或倒置培養(yǎng)培養(yǎng)時間至少14天，可選擇兩個溫度進行培養(yǎng)：在20℃-25℃培養(yǎng)至少7天，然后在30℃-35℃培養(yǎng)至少7天。如選擇其他培養(yǎng)計劃，應有試驗數(shù)據(jù)支持所選培養(yǎng)條件的適用性。在整個培養(yǎng)期間應連續(xù)監(jiān)控培養(yǎng)溫度。
6.10.2.2如實際生產(chǎn)過程中，分裝容器內(nèi)需要填充惰性氣體，在模擬試驗過程應考慮用無菌空氣替代。替代無菌空氣應通過與惰性氣體相同的管道系統(tǒng)以確保模擬惰性氣體的使用過程。如必須采用惰性氣體用以模擬厭氧無菌工藝（氧氣濃度低于0.1%）及培養(yǎng)厭氧微生物，應確認惰性氣體與培養(yǎng)基的組合是否支持相應微生物的生長。
培養(yǎng)結(jié)束后，應對所有模擬灌裝產(chǎn)品逐支進行無菌性檢查，通常應在合適的照度下進行目視觀察。
在培養(yǎng)期間，應定期觀察培養(yǎng)基的培養(yǎng)情況，如在培養(yǎng)期間發(fā)現(xiàn)異常情況時應做進一步調(diào)查。
如在培養(yǎng)后檢查中發(fā)現(xiàn)密封缺陷的灌裝產(chǎn)品，應進行適當?shù)脑蛘{(diào)查并采取糾正措施。
當灌裝不透明的容器，應考慮將轉(zhuǎn)移至透明容器觀察的可能性，以確保陽性容器的發(fā)現(xiàn)。
為保證模擬試驗結(jié)果的準確性，應對各個階段的模擬灌裝產(chǎn)品進行準確計數(shù)：包括灌裝、培養(yǎng)前檢查、培養(yǎng)后檢查的數(shù)量等。數(shù)量應平衡，如發(fā)現(xiàn)不平衡，應調(diào)查原因并判斷本次模擬試驗是否有效。
應通過風險評估確定日常生產(chǎn)環(huán)境監(jiān)控的各要素，如取樣點、取樣對象、取樣頻率、警戒和糾偏標準、實施方法等。
模擬試驗時應以日常生產(chǎn)的環(huán)境監(jiān)控方案為基礎，模擬生產(chǎn)狀況，包括采樣儀器、耗材的轉(zhuǎn)移、等，任何異于日常環(huán)境監(jiān)控的情況都應有說明和記錄。
與實際生產(chǎn)工藝相比，模擬試驗中的環(huán)境監(jiān)控應考慮增加額外的監(jiān)測環(huán)節(jié)，如人員監(jiān)測。
環(huán)境（包括人員）監(jiān)控的數(shù)據(jù)結(jié)果用于評估模擬生產(chǎn)過程中的環(huán)境條件是否適宜于生產(chǎn)。當模擬試驗出現(xiàn)陽性結(jié)果時，環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)可用于進行根本原因的調(diào)查。
模擬試驗時發(fā)生的環(huán)境偏差并不是模擬試驗成功的否決條件，是否通過試驗取決于調(diào)查的結(jié)果。環(huán)境監(jiān)測結(jié)果異常時，即使試驗結(jié)果成功，也應進行必要的調(diào)查和糾正。即使終決定在環(huán)境監(jiān)控結(jié)果超出糾偏標準時無菌工藝模擬試驗依然通過，也不意味著日常生產(chǎn)可以在同等環(huán)境偏差的條件下進行。
所有被在生產(chǎn)時進入無菌灌裝間的人員，包括操作人員、觀察人員和維修人員等，每年至少參加一次成功的無菌工藝模擬試驗。
模擬試驗方案的設計、實施及微生物污染調(diào)查應有具微生物方面專業(yè)知識的人員參與。
6.14.1.1凍干過程的進箱、凍干、出箱操作是凍干制劑無菌工藝一部分，因此應在無菌工藝模擬試驗中模擬產(chǎn)品的凍干操作過程。冷凍可能使培養(yǎng)基捕獲的微生物受損，影響其生長，因此方案設計時應給予考慮和評估。如影響明顯，則不推薦模擬冷凍過程。模擬凍干時，必須考慮真空度、維持時間及溫度。一定溫度下的真空度會使培養(yǎng)基沸騰，應避免這種情況的發(fā)生。
6.14.1.2 模擬凍干操作過程有以下兩種模式，企業(yè)應基于風險評估設計模擬的方式。
即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞，將容器轉(zhuǎn)移至凍干機內(nèi)，在凍干機箱體內(nèi)部分抽真空，維持真空狀態(tài)的時間短于實際凍干周期，然后箱體破空（可依據(jù)產(chǎn)品特性設計破空次數(shù)），在凍干機內(nèi)壓塞。應當有預防性措施確保培養(yǎng)基保持在有氧狀態(tài)以免阻礙微生物生長的情況發(fā)生。
此模式關(guān)注了風險的裝載和壓塞操作，但模擬凍干的時間較短，可能導致污染風險低于正常生產(chǎn)。
即培養(yǎng)基灌裝到容器中，半壓塞，將容器轉(zhuǎn)移至凍干機內(nèi)，模擬正常的生產(chǎn)的凍干時間，在凍干機箱體內(nèi)全部或部分抽真空，箱體破空，在凍干機內(nèi)壓塞，轉(zhuǎn)移至下道工序密封。
此種模式為全程模擬，和實際生產(chǎn)一致。但應關(guān)注長時間真空可能導致培養(yǎng)基水分揮發(fā)過度，可能降低微生物回收率，且較為費時。
6.14.1.3應基于風險評估設計模擬試驗時培養(yǎng)基在凍干機內(nèi)放置的位置。
6.14.1.4抽真空后，通常應采用無菌空氣代替惰性氣體平衡腔室壓力，以利于TSB培養(yǎng)基支持微生物的生長。
6.14.2.1懸濁液用于不溶性無菌產(chǎn)品，如一些抗生素、疫苗和皮質(zhì)激素。懸濁液模擬應包含懸濁液使用的工藝及相應的無菌操作。其他具有特殊工藝的懸濁液，模擬程序應該考慮其特殊性。
6.14.2.2模擬程序應該包括懸濁液生產(chǎn)的特征步驟，如安慰劑的，無菌粉末的加入和懸濁液的混合等。與液體制劑模擬差別之處在于無菌條件下，將無菌模擬介質(zhì)粉末加入到液體制劑過程。
6.14.2.3懸濁液的無菌操作與溶液制劑的無菌操作方法類似，但由于懸濁液劑型配制的步驟，會相應增加攪拌器、緩沖罐、管路以及相應的無菌操作等特別之處。上述步驟均應在模擬試驗中體現(xiàn)。
6.14.3.1無菌軟膏/乳膏/乳液/凝膠與溶液或懸濁液產(chǎn)品無菌工藝模擬試驗類似。模擬過程應涵蓋實際操作的工藝。盡量采用被模擬產(chǎn)品的工藝和無菌操作方式?？稍黾釉龀韯┑饶M介質(zhì)使其更接近被模擬產(chǎn)品特性。
6.14.3.2無菌軟膏的模擬通常不同于西林瓶或安瓿瓶的設上進行。模擬的基本方法是類似于其他劑型的。
6.14.3.3對于軟膏/乳膏/乳液/凝膠產(chǎn)品的模擬特點在于容器的檢查時，模擬介質(zhì)的轉(zhuǎn)出觀察需要特別注意。
6.14.4.1無菌產(chǎn)品中加入其他無菌物質(zhì)的過程應被模擬，例如混合、研磨、分裝以及其他工序。
6.14.4.2粉末灌裝設與液體灌裝設差異很大，模擬時常包含液體和/或粉末兩種無菌工藝操作。
如粉末模擬試驗用到無菌液體和無菌模擬介質(zhì)粉末兩種工藝操作，可采用單獨模擬一些液體容器作為陰性對照。
粉末無菌工藝模擬試驗中模擬介質(zhì)的模擬可能引起塵埃粒子檢測數(shù)據(jù)超標，可參考實際生產(chǎn)經(jīng)驗，記錄與分析粒子粒徑，分析粉末灌裝時是否會引起塵埃粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)浮動。
其他一些不常見的劑型，如吸入劑、氣霧劑和植入劑。 以上信息由常州市億寶干燥科技有限公司整理編輯，了解更多噴霧干燥,閃蒸干燥機,流化床干燥機,混合機信息請訪問http://www.czyibao.com |
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